结核病严重影响人民健康,是我国重点防治疾病之一。对结核(特别是肺结核)病及时、准确的诊断和彻底的治愈,不仅可恢复患者健康,而且是消除传染源、控制结核病流行最重要的措施。因此,准确、高效、便捷的结核诊断方法已成为结核相关研究的重点领域。目前,传统结核诊断方法众多,同时一些新方法逐渐成熟,但各有利弊。
传统诊断方法
1、影像诊断(肺结核)
细菌学检查是结核诊断的确切依据,但不是所有的结核都可得到细菌学证实。胸部X线检查也常是重要的。但是肺结核的胸部X线表现并无特征性改变,需注意与其他肺部疾病鉴别。另外,胸部CT扫描对隐匿部位等情况有补充性诊断价值。
2、涂片镜检法
包括抗酸染色法、荧光染色法、荧光抗酸联染法等。传统的抗酸染色虽可靠、适用,然而敏感性低;荧光法的仪器比较昂贵,设备要求高,检测时假阳性较高。但是荧光法检测结核分枝杆菌方面具有准确、快速、省时、敏感、实验方法简便等优点,医院采用,对早期发现传染源、积极治疗和采取有效控制传播具有重要意义。
3、细菌培养法
细菌分离培养法是结核病诊断的金标准,但存在检测周期长、阳性率低等缺点而不能满足快速诊断的需要。近年来已应用于临床的全自动培养系统具有无交叉污染,无放射性,连续监测标本,准确的数据处理系统等优点,是快速、敏感、高效的分离分枝杆菌的有效方法,但其仪器昂贵,成本高,短时间很难大范围推广,特别是基层医疗单位更难以推广。
4、结核菌素试验
临床上用于筛查及判断结核分枝杆菌感染的首选方法是结核菌素试验(TST),也称PPD试验,是现今还在应用中的一种古老的试验方法。目前国内诊断潜伏感染主要依据结核菌素皮试的结果,一般将PPD强阳性或短期内从阴性转为阳性,而无临床结核病证据者判断为结核菌潜伏感染者。此法所需费用较少,简单易行。但是,TST的缺点首先是特异性不够好。同时对于如中国等这样的结核病高度流行地区,由于广泛接种卡介苗,TST会造成假阳性;而在HIV感染患者、自身免疫性疾病、老人和幼儿等免疫力低下的人群中容易出现假阴性。其次,TST检测还存在费时(48-72小时)、需要受试者回访、皮试操作和结果解释存在主观依赖性等缺点。
5、噬菌体生物扩增法
噬菌体生物扩增法是由Wilson等于年建立的一种结核杆菌快速检测技术。该检测方法快速、简便,但是许多测定因素可影响检测结果,如噬菌体浓度与感染时间、杀毒剂灭活条件、预培养结果等,因此对测定条件要求较高,必须注意选择。
新型诊断方法
1、免疫学方法
胶体金法、酶联免疫斑点试验、干扰素释放试验等都属于此类。胶体金法主要检测结核菌特异性抗体,具有快速、敏感、简便等优点,利于基层医疗单位应用。酶联免疫斑点试验具有敏感度和特异度均较高等特点,包括酶联免疫斑点技术(ELISPOT)和基于同样原理的体外酶联免疫斑点技术(T.SPOT)。目前,国外实验室已将其用于常规检测结核病,运用十分成熟,但国内该方面的研究应用还比较少。干扰素释放试验(IGRA)除特异度较高外,还具有结果客观,24~48h可完成检测,不会激发记忆性免疫反应等优点,但其最大的缺点是价格贵,短时间内难以普遍推广。
2、分子生物学方法
PCR检测法和基因芯片检测技术是其中的典型代表。它们具有准确性、特异性强和敏感度高等优点,可联合运用,检测过程仅需6~8小时,有效解决了传统基因芯片应用过程中,需要大型检测设备、不便于临床推广应用的瓶颈问题。
另外,还有一些被广泛应用的分子生物学方法,包括:核酸探针检测法、蛋白芯片检测技术等。
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